במחקרי גנטיקה מולקולרית

מטרת שיטות מחקר גנטי מולקולרי - הקביעה בדבר קיומו של שינויים ושינויים בכרומוזומים מסוימים, באזורים DNA או גנים.השימוש הנרחב בפועל בדרך זו של עבודה עם DNA שהושג 70-80 שנים.במאה האחרונה.

תוכן: כאשר מנוהל במחקרי גנטיקה מולקולרית למנות מחקר גנטי מולקולרי איך הוא

מבחן גנטי מולקולרי כאשר מנוהל במחקרי גנטיקה מולקולרית

במחקרי גנטיקה מולקולרית לעזור לאבחן:

1. monogenicמחלה גנטית;
2. ההסתברות להתפתחות מחלות אונקולוגיות;
3. נוכחות של גורמים מחוללי מחלות מולטיפקטוריאלית.

Definition הסיכון של תהליכים אונקולוגיות באמצעות מחקר גנטי מולקולרי מגלה :

• הסיכון לחלות בסרטן הקיבה התריס;סבירות
• של סרטן המעי גס ו בשלבים המוקדמים של המחלה;
• נטייה גנטית לפתח סרטן בגוף הרחם, השחלות, השד והערמונית;
• רקומבינציה זמין גן ABL / BCR, זוהה לוקמיה;
• נוכחות של התנאים המעודדים את האפקטיביות של gefatinibom טיפול נגד סרטן בנוכחות קרצינומה non-small-cell.

באמצעות בדיקות גנטיות מולקולריות עבור נוכחות של תנאים מוקדמים נקבע גנטית של מחלות מולטיפקטוריאלית, אפשר לזהות את הסיכון:

• מחלת יתר לחץ דם;
• רעלת הריון;
• דלקת מפרקים שגרונית;
• אוסטיאופורוזיס;
• הפרעות בחילוף החומרים של שומנים;סוג סוכרת
• 1 ו 2;מחלות
• של מערכת הרבייה.

בשיטה זו להעריך את חילוף החומרים ואת ההצדקה לשימוש בתרופות מסוימות.

למנות מחקרים גנטיים מולקולריים

בדיקות גנטיות מולקולריות מוצגות אנשים:

• עקר;
• נתון גורמים סביבתיים קשים;
• שיש למיין של קרובי משפחה הסובלים מסרטן, בריאות הנפש, הלב וכלי הדם מחלות אנדוקריניות.

איך הוא

המבחן הגנטי המולקולרי דגימות

הראשון בשלב מולקולרי ניתוח גנטי הוא מאוד חשוב והוא להעניק DNA ו- RNA מייצגים שברי DNA נפרדת או תאים שלמים של השרשרת שלה.כדי לבודד את המספר הדרוש של שיטת הגברת שברים משמש, למשל הכפל שלהם על ידי תגובת השרשרת של פולימראז( שכפול אנזימטי).

כדי לנתח מולקולות DNA דורשות חלוקה הראשונית שלהם לחלקים ועיבוד endonucleases החיידקים( אנזימי הגבלה) - האנזימים אשר יכול לחתוך סליל הדנ"א כפול לחתיכות של 4-6 זוגות.שברי

DNA מופרדים לפי גודל ואורך באמצעות ג'ל מיוחד( polyacrylamide ו agarose) באמצעות אלקטרופורזה.תחת הפעולה של האחרון מועברים במורד ג'ל בקצב שונה, והשאיר פס דיסקרטי.

במחקרי גנטיקה מולקולרית של הפרעות בירושה משמשים גם כדי לחקור את הגנום האנושי.הכלאה של הדרום כתם מאפשר במקרה זה כדי לקבוע את שברי DNA ספציפיים הדרושים.בשנת הנופש ראשון זה denaturation של ה- DNA, ובכך לייצר שברים בשרשרת יחידה מועבר מסנן( ניילון או nitrocellulose) אשר ספוג פתרון חיץ.

ג'ל שבו שברי DNA מועברים על גבי נייר סינון עם מי מלח( ריכוז גבוה%).למעלה גבי הפונה מסנן ניטרוצלולוזה ואת המסנן, אבל הנייר היבש( לקלוט מלוח).כתוצאה מכך, דנ"א חד-גדילי להישאר על מסנן באותה תנוחה כמו ג'ל.

כדי לזהות את שהברים ההכרחיים של הליך כלת DNA מתבצע עם שהבר משובט ממנו או בדיקת DNA רדיואקטיבי.התוצאה של הליך זה הוא זוהה על ידי autoradiography, לפיה כל הבדיקות משלימות את רצף ה- DNA מוכרים בצורה של להקות רדיואקטיבי.

לשיטת הדרום מאפשר לשחזר את מפת ההגבלה של הגנום האנושי חלק מסוים של הגן.זה מאפשר לזהות את נוכחותם של כל פגמים בגן.השיטות שפותחו נחשבים יעילים למדי ולאפשר אבחון דיוק גבוהה של מחלות תורשתיות.לשם כך מתאי העובר הכלול השפיר, DNA מבודד.לאחר מכן, הוא הכלאה, באמצעות סופג דרום עם בדיקת DNA רדיואקטיבי.כתוצאה מכך, קל מאוד לזהות בעובר נורמלי, כי ה- DNA שלה הוא ההכלאה רק עם בדיקת DNA כי הוא משלים את רצף המוטציה.המדע המודרני

משתמשת במספר שיטות לזיהוי מוטציות.כולם נחלקים שיטות מחקר גנטיות מולקולריות עקיפות וישירות.

שיטות עקיפות מוטציות באיתור משמשות במקרה, אם אנחנו יודעים את המיקום של גן על המפה הגנטית, אך לא פתרו ידי רצף הנוקליאוטידים שלו.אבחנה ישירה

היא בכמה צורות:

1. רצף.טכניקה לגילוי זה כדי לקבוע את רצף הנוקלאוטידים של שבר החלפת סיבה ספציפית.
2. למחוק הכלאה אבל הדרום.ניתוח הגבלה זו שבה מוטציות שיש הגבלת מרחב פרות.כלת
3. Allelospetsificheskaya עם בדיקה סינטתית.שיטה זו גם מאפשרת לך לזהות מוטציות DNA הגנומי.
4. אלקטרופורזה של דנ"א דו-גדילי של ג'ל( denaturing אחיד, נייטרלי).זהו מחשוף DNA בתחומי הכימיה ברמה אנזימטי.במקומות אלה, שבהם בדרך כלל crosslinked בסיס שגוי להגדיר קבוצה של מוטציות.מחקר
5. של ניידות electrophoretic של מולקולות DNA מוטציה.
6. מסונתז ניתוח חלבון ידי אלקטרופורזה.הנוכחות של מוטציה נשפטת על ידי שינוי הניידות של חלבון במערכת חוץ גופית.מוטציות

מאובחנות גם על ידי גילוי שבר פולימורפיים( הגבלה על אורך) בגנום.כדי לעשות זאת, להשתמש באותה הטכניקה כתם של כלת דרום.

בין סוגי פולימורפיזם DNA אחרים גם להפריש מיקרו.הם רצף דנ"א קצרים( tandemly חוזרת דוּ, שָׁלוֹשׁ, ו tetranucleotide).הם משמשים כסמנים של מוטציות פגומות או לוקוסים סמן הגירסות אללים של הגן במחקר.

גן, אשר אחראי על התפתחות מחלת הנטינגטון, פתולוגיה חמורה, נפתח בשנת 1993, ירידה של התפתחות אינטלקטואלית הוא ציין במחלה זו, הפרעה של תנועות CNS אצל אנשים אחרי 40 שנים.המחלה היא תורשתית המועברת כאל תכונה דומיננטית אוטוזומלית, יש 100 penetrance%.גן מחלות ממוקם בכרומוזום 4, בזרוע הקצרה.

גן זה כולל רצף נוקליאוטידים בתוך החזרה מרובה של נוקלאוטיד CAG.אצל אנשים בריאים, החזרה הזו היא בדרך כלל 11-34, חולי כוריאה הם 37-86, אבל בדרך כלל 45. הדבר מצביע כי מחלת הנטינגטון - פתולוגיה תורשתית עם מוטציה של הגן עליה מרובה במספר העותקים( רחבה).

Viktorova ג'וליה, רופא מיילד-גניקולוג