Moleculaire genetische studies

toepassing van moleculair genetische onderzoeksmethoden - bepaling van de aanwezigheid van modificaties en veranderingen in bepaalde chromosomen, DNA of genen gebieden.Het wijdverspreide gebruik in de praktijk deze manier van werken met het DNA verkregen in 70-80 jaar.de vorige eeuw.

Inhoud: Bij toediening moleculair genetische studies Om moleculair genetisch onderzoek Hoe is moleculair genetische test

benoemen Indien toegediend moleculair genetische studies

Moleculaire genetische studies helpen bij de diagnose:

1. Monogenischegenetische ziekte;
2. kans op oncologische ontwikkeling van ziekten;
3. aanwezigheid van factoren die multifactoriële ziekte.

risico Definitie van oncologische processen met behulp van moleculaire genetische studie blijkt :

• risico op maagkanker en de schildklier;
• kans op darmkanker en de vroege stadia van de ziekte;
• De genetische aanleg voor kanker van de baarmoeder lichaam, eierstok-, borst- en prostaatkanker te ontwikkelen;
• Beschikbaarheid genrecombinatie ABL / BCR, gedetecteerd in leukemieën;
• aanwezigheid van omstandigheden die bevorderlijk zijn om de effectiviteit van anti-kanker therapie gefatinibom in de aanwezigheid van niet-kleincellig longcarcinoom.

door moleculaire genetische testen op de aanwezigheid van genetisch bepaalde vereisten van multifactoriële ziekten, is het mogelijk om het risico te identificeren:

• hypertensieve ziekte;
• preëclampsie;
• reumatoïde artritis;
• osteoporose;
• aandoeningen van het vetmetabolisme;
• diabetes mellitus type 1 en 2;
• ziekten van het voortplantingssysteem.

Met deze methode te evalueren metabolisme en rechtvaardiging voor het gebruik van bepaalde medicijnen.

Om moleculair genetische studies benoemen

Moleculair genetische tests zijn te zien personen:

• onvruchtbaar;
• onderworpen aan ongunstige omgevingsfactoren;
• met het sorteren van naaste familie die lijden aan kanker, geestelijke gezondheid, cardiovasculaire en endocriene ziekten.

Hoe moleculair genetische test

eerste fase moleculair genetische analyse is zeer belangrijk en is aan DNA en RNA monsters die een afzonderlijke DNA- fragmenten of gehele cellen van de keten te vertegenwoordigen.Om het vereiste aantal fragmenten amplificatiewerkwijze isoleren wordt toegepast, d.w.z. vermenigvuldiging door polymerasekettingreactie( enzymatische replicatie).

Analyseren DNA-moleculen vereisen hun voorlopige verdeling in delen en behandelen van bacteriële endonucleasen( restrictie-enzymen) - enzymen die een DNA dubbele helix kan in stukken van 4-6 paren.

DNA-fragmenten worden gescheiden op grootte en lengte met behulp van een speciale gel( polyacrylamide en agarose) met behulp van elektroforese.Onder invloed van deze laatste bewogen langs de gel bij verschillende snelheden, waardoor een afzonderlijke strip.

Moleculair genetische studies van erfelijke afwijkingen worden ook gebruikt om het menselijk genoom te bestuderen.Blot hybridisatie van Southern maakt in dit geval de nodige specifieke DNA-fragmenten te bepalen.In de eerste plaats denaturatie van het DNA, waardoor fragmenten produceren in een enkele keten en wordt overgebracht naar een filter( nylon of nitrocellulose) die is ondergedompeld in een bufferoplossing.

gel waarbij DNA-fragmenten worden overgebracht op een filtreerpapier met pekel( hoog% concentratie).Top gesuperponeerd wordt nitrocellulosefilter en het filter, maar droog papier( zoutoplossing te absorberen).Hierdoor enkelstrengs DNA blijven op het filter in dezelfde positie in de gel.

Om de noodzakelijke fragmenten van DNA hybridisatie procedure wordt uitgevoerd met gekloneerde fragment daarvan of radioactieve DNA-probe uitgevoerd identificeren.Het resultaat van deze procedure wordt gedetecteerd door autoradiografie, waarbij alle probes complementair aan de DNA-sequentie opgenomen in de vorm van radioactieve banden.

de Southern werkwijze maakt het mogelijk de kaart van het menselijk genoom restrictie opnieuw in een bepaald deel van het gen.Dit maakt het mogelijk om de aanwezigheid van defecten in het gen te detecteren.De ontwikkelde methoden worden beschouwd als zeer effectief te zijn en maken zeer nauwkeurige diagnose van erfelijke ziekten.Hiertoe uit foetale cellen in het vruchtwater, geïsoleerde DNA.Vervolgens wordt gehybridiseerd met behulp van Southern blotting met een radioactieve DNA-probe.Daardoor zeer gemakkelijk om een ​​abnormale embryo herkennen, omdat de DNA gehybridiseerd enkel DNA-probe die complementair is met de mutante sequentie.

moderne wetenschap maakt gebruik van een aantal methoden om mutaties te detecteren.Ieder van hen zijn verdeeld in indirecte en directe moleculair genetisch onderzoek methoden.

Indirecte werkwijzen voor het detecteren van mutaties worden in het geval, als we de positie van een gen op de genetische kaart, maar niet opgelost door de nucleotidesequentie.

Direct diagnose is in verschillende vormen:

1. sequencing.Deze detectietechniek met de nucleotidesequentie van het vervangende fragment in een specifieke reden bepalen.
2. vlek hybridisatie, maar Zuid.Deze restrictie-analyse waarmee mutaties hebben schendingen ruimte beperkingen.
3. Allelospetsificheskaya hybridisatie met een synthetische probe.Deze methode maakt het ook mogelijk om mutaties te identificeren in genoom DNA.
4. elektroforese van dubbelstrengs DNA in de gel( denaturerende gelijkmatig neutraal).Het is een DNA-klieving in de chemische en enzymatische niveau.In die plaatsen, waar het meestal verkeerd verknoopt basis definiëren een groep van mutaties.
5. studie van de elektroforetische mobiliteit van mutant DNA moleculen.
6. gesynthetiseerd eiwitanalyse door elektroforese.De aanwezigheid van mutatie wordt beoordeeld door de verandering in de mobiliteit van het eiwit in het in vitro systeem.

mutaties ook gediagnosticeerd door detectie van polymorfe fragmenten( beperking van de lengte) in het genoom.Om dit te doen, maken gebruik van dezelfde blot techniek van Southern hybridisatie.

onder andere DNA polymorfisme ook microsatellieten scheiden.Ze zijn korte DNA-sequentie( in tandem herhaling di-, tri- en tetranucleotide).Ze dienen als markers van defecte mutaties of markerloci allelische varianten van het gen in de studie.

gen, dat verantwoordelijk is voor de ontwikkeling van de ziekte van Huntington, ernstige pathologie, werd geopend in 1993, is een daling van intellectuele ontwikkeling waargenomen In deze ziekte, een aandoening van het centrale zenuwstelsel bewegingen bij mensen na 40 jaar.De ziekte is erfelijk en overgedragen als een autosomale dominante eigenschap heeft 100% penetrantie.Ziekte gen is gelokaliseerd in chromosoom 4, in de lange arm.

Dit gen een nucleotidesequentie omvat die in een meervoudige herhaling van CAG nucleotide.In gezonde mensen, deze herhaling normaal 11-34, chorea patiënten 37-86, maar meestal 45. Dit suggereert dat de ziekte van Huntington - een erfelijke pathologie met een mutatie van het gen in een meervoudige toename van het aantal kopieën( expansie).

Viktorova Julia, een verloskundige-gynaecoloog