estudos genéticos moleculares

finalidade

de métodos de pesquisa de genética molecular - determinação da existência de modificações e alterações em alguns cromossomas, de ADN ou genes áreas.O uso difundido na prática esta forma de trabalhar com o DNA obtido em 70-80 anos.o último século.

Conteúdo: Quando administrado estudos de genética molecular Nomear pesquisa genética molecular Como é molecular teste genético

Quando administrado estudos de genética molecular

Molecular estudos genéticos ajudar a diagnosticar:

1. monogênicasdoença genética;
2. probabilidade de desenvolvimento de doenças oncológicas;presença
3. de factores que causam doença multifactorial.

Definição risco de processos oncológicas utilizando estudo de genética molecular revela :

• risco de cancro do estômago e tiróide;
• risco de cancro do cólon e os estágios iniciais da doença;
• A predisposição genética para desenvolver cancro do corpo uterino, ovariano, mama e próstata;
• gene Disponibilidade recombinação ABL / BCR, detectado em leucemias;presença
• condições propícias para a eficácia da terapia anti-cancro gefatinibom na presença de carcinoma das células não pequenas.

Através de testes de genética molecular para detectar a presença da pré-requisitos geneticamente determinadas de doenças multifactoriais, é possível identificar o risco de: doença hipertensiva

• ;
• pré-eclâmpsia;
• artrite reumatóide;
• osteoporose;
• distúrbios do metabolismo de lípidos;
• diabetes mellitus tipo 1 e 2;doenças
• do sistema reprodutivo.

Com este método avaliar o metabolismo e justificativa para o uso de certos medicamentos.

Para nomear estudos genéticos moleculares

Molecular testes genéticos são mostrados pessoas:

• infértil;
• sujeito a factores ambientais adversos;
• ter que classificar de parentes próximos que sofrem de câncer, saúde mental, doenças cardiovasculares e endócrinas.

Como é o

teste genético molecular

primeira fase de análise genética molecular é muito importante e é fornecer amostras de ADN e ARN que representam um fragmentos de DNA separados ou culas inteiras da sua cadeia.Para isolar o número necessário de fragmentos método de amplificação é utilizado, isto é, a sua multiplicação através da reacção em cadeia da polimerase( replicação enzimática).

Para analisar moléculas de DNA requerem a sua divisão em partes preliminar e processar as endonucleases de restrição bacteriana( enzimas) - enzimas que podem cortar uma dupla hélice de ADN em pedaços de 4-6 pares.fragmentos

de DNA são separados por tamanho e comprimento usando um gel especial( poliacrilamida e agarose a) utilizando electroforese.Sob a acção deste último são movidos para baixo o gel a taxas diferentes, deixando uma faixa discreta.

Molecular estudos genéticos de anomalias hereditárias também são utilizados para estudar o genoma humano.Blot hibridação de Southern permite, neste caso, para determinar os fragmentos de ADN específicos necessários.Neste primeiro recurso a desnaturação do ADN, produzindo, assim, fragmentos de uma única cadeia e é transferido para um filtro( de nylon ou de nitrocelulose), que está embebida numa solução tampão.gel

em que os fragmentos de ADN são transferidos para um papel de filtro com solução salina( concentração alta%).Topo sobreposta transforma filtro de nitrocelulose e o filtro, mas o papel seco( para absorver soro fisiológico).Como um resultado, o DNA de cadeia simples permanecem no filtro na mesma posição como na de gel.

Para identificar os fragmentos necessárias do procedimento de hibridação de DNA é realizada com o fragmento clonado do mesmo ou sonda de ADN radioactivo.O resultado deste processo é detectado por autorradiograf ia, em que todas as sondas complementares para a sequência de ADN reconhecida na forma de bandas radioactivas.

com o método Southern torna possível recriar o mapa de restrição do genoma humano numa certa parte do gene.Isto faz com que seja possível detectar a presença de eventuais defeitos no gene.Os métodos desenvolvidos são considerados para ser muito eficaz e permitir o diagnóstico de alta precisão de doenças hereditárias.Para este efeito, a partir de células fetais contidas no fluido amniótico, o DNA isolado.Subsequentemente, é hibridada, utilizando transferência de Southern com uma sonda de ADN radioactivo.Como resultado, muito fácil de reconhecer um embrião anormal, porque o seu ADN é hibridizada apenas com a sonda de DNA que é complementar da sequência mutante.

ciência moderna utiliza uma série de métodos para detectar mutações.Todos eles são divididos em métodos de pesquisa genética molecular diretos e indiretos.

métodos indirectos para mutações de detecção são utilizados no caso, se conhecer a posição de um gene no mapa genético, mas não resolvido pela sua sequência de nucleótidos.

diagnóstico direto é em várias formas:

1. sequenciamento.Esta técnica de detecção para determinar a sequência de nucleótidos do fragmento de substituição com um motivo específico.
2. blot hibridação mas Southern.Esta análise de restrição com as quais as mutações estão tendo restrição espaço violações.hibridação
3. Allelospetsificheskaya com uma sonda sintética.Este método também permite identificar mutações no DNA genômico.
4. electroforese de ADN de cadeia dupla no gel( desnaturação uniformemente, neutra).É uma clivagem do ADN no nível enzimática e química.Nesses locais, onde geralmente reticulados de forma incorrecta base de definir um grupo de mutações.estudo
5. da mobilidade electroforética de moléculas de ADN mutantes.
6. sintetizado análise de proteínas por electroforese.A presença de mutação é julgado pela alteração na mobilidade da proteína no sistema in vitro.mutações

também diagnosticada através da detecção de fragmentos de restrição polimórficos( em comprimento) no genoma.Para fazer isso, use a mesma técnica blot da hibridação Southern.

Entre outros tipos de polimorfismos de ADN também secretam microssatélites.Eles são uma sequência de ADN curta( em tandem repetindo di-, tri-, e tetranucleótideo).Eles servem como marcadores de mutações defeituosos ou marcador loci variantes alélicas do gene em estudo.

gene, que é responsável para o desenvolvimento da doença de Huntington, patologia grave, foi aberta, em 1993, uma diminuição do desenvolvimento intelectual se observa nesta doença, um distúrbio dos movimentos do SNC em pessoas depois de 40 anos.A doença é hereditária e transmitida como uma característica autossómica dominante, tem penetrância de 100%.gene da doença está localizado no cromossoma 4, no braço curto.

Este gene inclui uma sequência de nucleótidos em uma repetição CAG múltiplo de nucleótidos.Em pessoas saudáveis, esta repetição é normalmente 11-34, os pacientes são coreia 37-86, mas normalmente 45. Isto sugere que a doença de Huntington - uma patologia hereditia com uma mutação do gene num aumento múltiplo do número de cópias( expansão).

Viktorova Julia, um ginecologista-obstetra