Molekylärgenetiska studier

syftet med molekylärgenetiska forskningsmetoder - bestämning av förekomsten av modifieringar och förändringar i vissa kromosomer, DNA eller gener områden.Den utbredda användningen i praktiken detta sätt att arbeta med DNA som erhållits i 70-80 år.det senaste århundradet.

Innehåll: Vid administrering molekylärgenetiska studier för att utse molekylärgenetisk forskning Hur är molekylärgenetisk prov

Vid administrering molekylärgenetiska studier

molekylärgenetiska studier att diagnostisera:

1. monogenagenetisk sjukdom;
2. sannolikhet för onkologisk sjukdomar utveckling;
3. närvaro av faktorer som orsakar multifaktoriell sjukdom.

risk Definition av onkologiska processer med användning av molekylärgenetisk undersökning avslöjar :

• risk för magcancer och sköldkörtel;
• sannolikheten för tjocktarmscancer och de tidiga stadierna av sjukdomen;
• Den genetisk predisposition för att utveckla cancer i livmoderkroppen, äggstockscancer, bröstcancer och prostata;
• Tillgänglighet genrekombination ABL / BCR, detekteras i leukemier;
• närvaro av betingelser som befrämjar effektiviteten av anticancerterapi gefatinibom i närvaro av icke-små-cell carcinoma.

Genom molekylärgenetiska tester för förekomst av genetiskt bestämda förutsättningar multifaktoriella sjukdomar, är det möjligt att identifiera risken för:

• hypertensiv sjukdom;
• preeklampsi;
• reumatoid artrit;
• osteoporos;
• störningar av lipidmetabolism;
• diabetes mellitus typ 1 och 2;
• sjukdomar i det reproduktiva systemet.

Med denna metod utvärdera ämnesomsättning och motivering för användningen av vissa mediciner.

För att utse molekylärgenetiska studier

Molekylära genetiska tester visas personer:

• infertila;
• utsattes för ogynnsamma miljöfaktorer;
• behöva sortera om nära släktingar som lider av cancer, mental hälsa, hjärt- och endokrina sjukdomar.

Hur är molekyl genetiskt test

första fasen molekylär genetisk analys är mycket viktigt och är att tillhandahålla DNA- och RNA-prover som representerar en separat DNA-fragment eller hela celler av sin kedja.Att isolera det erforderliga antalet fragment amplifieringsmetoden används, dvs deras förökning genom polymeraskedjereaktion( enzymatisk replikering).

För att analysera DNA-molekyler kräver deras preliminära uppdelning i delar och behandling av bakteriella endonukleaserna( restriktionsenzymer) - enzymer som kan skära en DNA-dubbelspiral i bitar om 4-6 par.

DNA-fragmenten separeras med avseende på storlek och längd med användning av en speciell gel( polyakrylamid och agaros) med användning av elektrofores.Under inverkan av den senare förflyttas nedåt gelén vid olika hastigheter, vilket ger en separat remsa.

molekylärgenetiska studier av ärftliga avvikelser används också för att studera det mänskliga genomet.Blot hybridisering av Southern gör i detta fall fastställa nödvändiga specifika DNA-fragment.I detta första utväg för att denaturering av DNA: t, varigenom fragment i en enda kedja och överföres till ett filter( nylon eller nitrocellulosa), som är indränkt i en buffertlösning.

gel i vilken DNA-fragmenten överfördes på ett filterpapper med saltlösning( hög% koncentration).Topplagrad vänder nitrocellulosafilter och filtret, men det torra papperet( för att absorbera saltlösning).Som ett resultat, enkelsträngat DNA kvar på filtret i samma läge som i gelén.

För att identifiera de nödvändiga fragmenten av DNA-hybridisering förfarande utförs med det klonade fragmentet därav eller radioaktiv DNA-sond.Resultatet av detta förfarande detekteras genom autoradiografi, varvid alla prober komplementära till DNA-sekvens som känns igen i form av radioaktiva band.

till södra metod gör det möjligt att återskapa restriktionskarta över det humana genomet i en viss del av genen.Detta gör det möjligt att påvisa förekomsten av eventuella defekter i genen.De utvecklade metoderna anses vara ganska effektiva och tillåta hög precision diagnos av ärftliga sjukdomar.För detta ändamål från fetala celler som finns i fostervattnet, isolerat DNA.Därefter är det hybridiseras, med användning av Southern blotting med en radioaktiv DNA-sond.Som ett resultat, mycket lätt att känna igen ett onormalt embryo, eftersom dess DNA hybridiserade endast med DNA-sond som är komplementär till den mutanta sekvensen.

Modern vetenskap använder ett antal metoder för att upptäcka mutationer.Alla av dem är indelade i indirekta och direkta molekylärgenetiska forskningsmetoder.

Indirekta metoder för detektion av mutationer används i fallet, om vi vet positionen av en gen på den genetiska kartan, men inte löses av dess nukleotidsekvens.

Direkt diagnos är i flera former:

1. sekvensering.Denna detekteringsteknik för att bestämma nukleotidsekvensen av ersättningsfragmentet i en specifik anledning.
2. blot hybridisering, men södra.Detta restriktionsanalys som mutationer har kränkningar utrymme begränsning.
3. Allelospetsificheskaya hybridisering med en syntetisk sond.Den här metoden kan du också identifiera mutationer i genomisk DNA.
4. elektrofores av dubbelsträngat DNA i gelén( denaturerande likformigt, neutral).Det är en DNA-klyvning i den kemiska och den enzymatiska nivån.På de ställen, där vanligtvis felaktigt tvärbundna bas definiera en grupp av mutationer.
5. studie av elektroforetisk mobilitet av mutanta DNA-molekyler.
6. syntetiserade proteinanalys genom elektrofores.Närvaron av mutationen bedömes genom förändringen i mobilitet av proteinet i den in vitro-system.

mutationer diagnostiseras även genom att detektera polymorfa fragment( restriktions på längden) i genomet.För att göra detta, använder samma blot teknik för Southern hybridisering.

Bland andra typer DNA-polymorfism utsöndrar även mikrosatelliter.De är en kort DNA-sekvens( i tandem repete di-, tri-, och tetranukleotid).De tjänar som markörer för defekta mutationer eller markör loci allelvarianter av genen i studien.

gen, som är ansvarig för utvecklingen av Huntingtons sjukdom, svår patologi, öppnades 1993, en minskning med intellektuella utveckling som observerats i denna sjukdom, en störning i CNS rörelserna hos personer efter 40 år.Sjukdomen är ärftlig och överförs som en autosomal dominant egenskap, har 100% penetrans.Sjukdom-genen är belägen i kromosom 4, i den korta armen.

Denna gen innehåller en nukleotidsekvens i en multipel upprepning av CAG nukleotid.Hos friska personer är denna upprepning normalt 11-34, korea patienter är 37-86, men oftast 45. Detta tyder på att Huntingtons sjukdom - en ärftlig patologi med en mutation av genen i en multipel ökning av antalet kopior( expansion).

Viktorova Julia, en förlossningsläkare-gynekolog